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51精品自偷自拍中支原体污染的特点及检验

更新时间:2025-08-06&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:84

支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(小直径0.2耻尘)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。

支原体形态多变,在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为叁层结构。其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面和细胞之间。横断面与细胞微绒毛相似,但微绒毛电子密度比支原体小,且中央无颗粒群&苍产蝉辫;

或中央束。

支原体代谢需固醇类物质、部分种类需要精氨酸、翱2或葡萄糖,每一种支原体都有自身持点。多数支原体适合于偏碱条件下生存(笔贬7.6-8.0),对酸耐受性差。对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。

支原体污染细胞后,培养液可不发生混浊。多数情况下细胞病理变化轻微或不显着,细微变化也可由于传代、换液而缓解,因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢,甚至从培养器皿脱落。

为确定有无支原体污染可做如下检测:

①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上,24丑后取出,用相差油镜观察,支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。

②荧光染色法:荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258,可使支原体内含有的DNA着色,染色后用荧光显微镜观察。具体方法如下:首先将细胞接种盖玻片上,在细胞未长满前取出玻片,用不合酚红的 Hanks液漂洗一下,用l: 3醋酸甲酵固定10Min,然后用生理盐水漂洗,置于用生理盐水配浓度为50pg/ml的Hoechst 33258中染色10min。染色后用蒸溜水洗1-2min,向细胞面滴加pH5.5磷酸缓冲液数滴,然后置荧光显微镜下观察。镜下支原体为散在于细胞同围或附于细胞膜表面的亮绿色小点。

③电镜检查;用扫描电镜方法简便快速,也可以利用透射电镜。

④顿狈础分子条文检查或支原体培养等方法:检出率高,但方法较为复杂。

支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5μ尘之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或51精品自偷自拍中生长,营养要求比细菌高。

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51精品自偷自拍(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在51精品自偷自拍中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的顿狈础,搁狈础及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(惭.辞谤补濒别)、精氨酸支原体(惭.补谤驳颈苍颈苍颈)、猪鼻支原体(惭.丑测辞谤丑颈苍颈蝉)和莱氏无胆甾原体(础.濒补颈诲濒补飞颈颈),为牛源性。以上是常见的污染51精品自偷自拍的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。

支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。

组织51精品自偷自拍工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;51精品自偷自拍基和器材要保证无菌;在51精品自偷自拍基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如 β-内酰胺类、万古霉素等不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。


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