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细胞为什么要贴壁？

细胞贴壁的过程使形态发生很大变化，细胞形态改变是细胞内骨架（是真核细胞中的蛋白纤维网架体系，由微管、微丝及中间纤维组成的体系）本身和细胞外基质共同作用的结果。

密度大于培养基的细胞（绝大部分细胞）会沉降在底面上，那么细胞要生存必定得改善这个环境，分泌细胞外基质，改善底面的结构，然后很自然就贴附在底面上了。

密度小于水的细胞，如脂肪细胞，漂浮在液面上，所以不可能贴在底面上，但是如果将培养液加满，那么细胞能够与培养瓶上面的壁接触同样可以贴壁。因此可以说，细胞贴壁是适应环境的一种反应。

细胞不贴壁，可能是这些原因？

细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。

缺少贴壁因子：血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。

支原体或细菌的污染。

培养液配置、储存不当，如 pH 值过碱，Gln 量太少等原因。

复苏的细胞本身状态不好，已经老化，失去贴附性。

接种细胞数目太少，无法分泌足够的细胞外基质。

复苏时处理速度太慢，复苏过程不当。

复苏后注意事项

细胞复苏后只有非常少量细胞贴壁，是不是需要重新复苏？先不要着急丢掉！可以补加血清和细胞因子，或者每隔 2-3 天换新鲜的生长培养基，经过 2-3 次换液后，大部分细胞就能看到明显增殖，此时再按照正常传代操作即可。

细胞复苏后刚开始已经贴壁了状态不错，后面第二天开始出现死亡现象，这个情况可能是冻存前细胞消化过度，或者冻存中收冻存液蝉丑补丑补颈细胞凋亡导致的情况。