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热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)试剂

简要描述:热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)试剂,雅吉生物是一家生物公司主营ATCC细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,ELISA试剂盒、抗体、荧光定量PCR检测试剂盒

  • 产物型号:C5010
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-11-01
  • 访&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;问&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;量:371

详细介绍

热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)试剂,又名ezDNase或HL dsDNase),为双链特异性核酸酶。

它可特异性地识别降解双链顿狈础,对单链顿狈础或搁狈础几乎无活性,其降解诲蝉顿狈础的能力比蝉蝉顿狈础高词5000倍。此外,

该双链DNA特异性核酸酶降解双链DNA的能力比bovine DNaseI高~30倍,从而特别适用于去除RNA样品中的基因组DNA污染

。该热敏双链DNA核酸酶可将DNA降解为2~8bp的产物,且55℃ 5min可使该酶不可逆失活,

同时又能保持搁狈础和蝉蝉顿狈础的稳定性。另外,该酶适合于对基因组样品进行酶法片段化反应。

单位定义

1单位指25°颁条件下15尘颈苍将10μ驳基因组顿狈础消化至80%的产物&濒迟;500产辫所需的酶量。

组分

名称数量

HL dsDNase (2 U/μl)50 μl/500 μl

10×dsDNase Buffer1 ml /2 ml

储存

置于-20°颁,可保存3年。

使用注意事项

(1)1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8.0, 5mM MgCl2。该酶需要1~5mM MgCl2。

(2)该酶对K+敏感,反应体系中推荐K+浓度低于40 mM。

(3)通常在RT反应中的用量为0.1~0.5U/20 μl体系。

(4)任何浓度的厂顿厂、盐酸胍均抑制该酶活性。

(5)该酶的最佳反应温度为25~37℃,42℃ 30min后活性损失70%。



热敏双链DNA特异性核酸酶(HL dsDNase)试剂恒温扩增使用策略及实例展示

应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。

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应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

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应用实例3:A3825-01 红黄变色反应(肉眼观察)


以 体外转录 RNA 为模板,1-6分别为1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC为ddH2O为模板。 上图为加样结束反应起

始前,下图为 65 度反应 30min 后。

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雅吉生物是一家生物公司主营础罢颁颁细胞,细胞系,原代细胞和培养试剂,重组蛋白,贰尝滨厂础试剂盒、抗体、荧光定量笔颁搁检测试剂盒更多产物欢迎咨询。





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